Desarrollo de focos de criptas aberrantes(FCA) en colon y recto en ratas tratadas como 1,2- Dmetilhidrazina (DMH)
Resumen
Los Focos de Criptas Aberrantes (FCA), son considerados lesiones tempranas precursoras del cáncer colónico, tanto en seres
humanos como en roedores. Los FCA son muy utilizados en modelos biológicos experimentales como una manera inequívoca de
determinar lesiones tempranas antes del desarrollo de una neoplasia y así investigar de qué manera ciertos químicos o dietas,
pueden actuar en el proceso de la carcinogénesis colónica ya sea como iniciadores, promotores o inhibidores.
El objetivo del presente trabajo consistió en determinar y caracterizar mediante el estudio microscópico, el desarrollo de FCA en
diferentes periodos de inducción con la droga cancerígena 1,2-Dimetilhidralazina (DMH) en ratas. Para ello, se utilizaron ratas Wistar
obtenidas del Bioterio de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UNL. Los animales fueron alojados en un ambiente climatizado
con temperatura controlada (21ºC), mantenidos en jaulas metálicas compartidas por dos individuos, con agua y dieta con alimento
balanceado ad-libitum. Se conformaron dos grupos: tratados con DMH (n=15) y controles sin DMH (n=6). Luego de un período de
adaptación a las nuevas condiciones del bioterio y cuando alcanzaron el peso promedio adecuado (+200 gramos) se inició la
inoculación semanal con DMH en una dosis de 40 mg/kg por vía subcutánea (SC), durante cinco semanas. El primer sacrificio se
realizó en la quinta semana post-inoculación, el segundo en la décima y el último a las quince semanas post-inoculación. En cada
momento se sacrificaron 5 ratas del grupo tratado con DMH y 2 ratas del grupo control, utilizando Euthanyle® 0,5 ml vía
intraperitoneal con previa anestesia general (ketamina 100 mg/kg vía SC). En la necropsia, el intestino grueso (ciego, colon proximal,
colon distal y recto) fue retirado y abierto longitudinalmente realizando un corte sobre el lado opuesto a la inserción mesentérica, a fin
de observar la mucosa y la presencia de lesiones. Cada parte anatómica fue lavada y fijada en formol al 10% durante 24 horas, para
posteriormente ser coloreada con Azul de Toluidina al 1% durante 15 segundos, y observada por transiluminación mediante lupa
estereoscópica y Microscopía Electrónica de Barrido (MEB). En cada una de las partes anatómicas, el estudio microscópico permitió
determinar la presencia, la localización, el número de criptas, así como las características morfológicas de los FCA, analizados en los
diferentes momentos de inducción de la carcinogénesis. Los resultados indican además, que en el mínimo período post-inoculación
de 5 semanas, ya aparecieron FCA compuestos por 1, 2 o 3 criptas. Además se observó que a mayor tiempo de exposición de la
droga cancerígena, los FCA se incrementaron en número y en tamaño, observándose en el último sacrificio FCA compuestos por
más de 5 criptas. No se observaron cambios de comportamiento ni en la etapa de inyección de la DMH (5 semanas) ni en la etapa
de desarrollo de FCA (15 semanas).En lo que respecta al peso todos los animales ganaron peso a lo largo de la experiencia, sin
diferencias entre ambos grupos al concluir el experimento.
El presente trabajo permitió estandarizar un modelo biológico de carcinogénesis colónica en un corto período de inducción (5
semanas) y determinar la utilidad de la técnica de coloración con Azul de Toluidina como método de diagnóstico de los FCA, así
como caracterizar a los FCA morfológicamente mediante MEB.