Comportamiento diferencial del veneno de ejemplares juveniles y adultos de Bothrops diporus
Resumen
Las serpientes venenosas Bothrops diporus (yarará chica) y Bothrops alternatus (yarará grande) que habitan la región nordeste de
Argentina son responsables de la mayoría de las intoxicaciones ofídicas. Estos venenos bothrópicos inducen miotoxicidad en el sitio
de la inoculación caracterizada por necrosis y asociada a otros efectos locales como hemorragia, sangrado y edema. Sin embargo, la
composición proteica de los venenos de ofidios puede presentar variaciones intraespecíficas, geográficas u ontogénicas con lo cual
deberíamos esperar que el envenenamiento por una serpiente ya sea en estado juvenil o adulto, podría devenir en la ineficacia del
antiveneno en neutralizar los principales efectos adversos. Por lo tanto, es de interés evaluar la actividad enzimática de forma
comparada entre ejemplares adultos y juveniles de B. diporus con el fin de determinar la existencia de variaciones en las
propiedades biológicas/farmacológicas de los venenos. Para ello, se utilizó veneno desecado de B. diporus en ambos momentos de
su desarrollo de individuos en cautiverio de la provincia de Corrientes. Cada una de las soluciones de veneno se sometió a análisis
de proteínas por SDS-PAGE. Se midieron actividades fosfolipasa A2 (hemolítica indirecta), coagulante, proteolítica sobre azocaseína
y amidolítica (sobre un sustrato sintético cromogénico) y también se evaluó la actividad citotóxica de los venenos sobre una línea
celular murina de mioblastos C2C12. En el perfil electroforético se observó una distribución de proteínas típica de venenos
bothrópicos con masas moleculares entre 14 y 70 kDa en condiciones reductoras, tanto en adultos como en juveniles no
evidenciando marcadas diferencias. En cuanto a la actividad fosfolipásica, el veneno de B. diporus juvenil (Bdj) exhibió mayor
capacidad hidrolítica, ya que 0,47 μg indujeron un halo hemolítico de 15 mm de diámetro en tanto que el veneno de individuos
adultos de Bothrops diporus (Bda) requirió 3,75 μg para generar el mismo halo. Con respecto a la actividad coagulante, Bdj fue
capaz de coagular el plasma en 13,6 seg mientras que una solución de veneno de Bda de igual concentración coaguló en 46,2 seg.
La actividad amidolítica sólo fue detectada en el veneno de B. diporus adulto que mostró capacidad de escindir al sustrato
cromogénico (BApNA) solo a la mayor concentración estudiada (4mg/mL). En relación con la actividad proteolítica, los valores
hallados mediante el ensayo de digestión de la azocaseína indican similitud en la actividad enzimática de los venenos de los
ejemplares adultos y juveniles. Finalmente, los ensayos de miotoxicidad sobre C2C12 muestran un comportamiento
significativamente diferencial en las concentraciones mayores donde el veneno de Bda establece una viabilidad celular menor (20%)
que el correspondiente a los indsividuos juveniles (30%). Los resultados del presente estudio indican que las diferencias en
composición de familia de proteínas del veneno de Bdj y Bda varían principalmente en relación con la actividad proteolítica. En
conclusión, se constató una clara diferencia en el comportamiento de ambos venenos (Bdj y Bda). Estos resultados aportan valiosa
información que podría ser tenido en cuenta en la producción de sueros antibotrópicos.