Determinación de p63 en neoplasias mamarias caninas

Abstract

P63 es un homólogo del gen p53, se lo describe como un factor de transcripción nuclear con funciones diversas en el ciclo celular que van desde la apoptosis a la diferenciación. Su expresión se ha descripto en células mioepiteliales de neoplasias benignas y malignas de la mama canina y ha sido aplicado para describir la histogénesis de los componentes mesenquimáticos de las neoplasias complejas y mixtas. Aquí se comunican los resultados de la inmunomarcación con p63 de neoplasias mamarias malignas, que tuvo como objetivo analizar las posibilidades diagnósticas y pronósticas de este marcador. Se trabajó con muestras de 50 pacientes afectadas por neoplasias espontáneas, monitoreadas durante 18 meses post-cirugía. Este material había sido fijado en formol bufferado al 10% y procesado dentro de las 24 horas siguientes, de acuerdo con la técnica histológica clásica. Cada caso ha sido diagnosticado de acuerdo con la Clasificación de Tumores mamarios caninos establecida por Goldshmidt. Se ha determinado el Grado de Malignidad tumoral (GM) siguiendo el “Sistema de Graduación Histológica de malignidad de los carcinomas mamarios caninos y felinos”, propuesto por Misdorp (2002). Para la inmunomarcación se realizaron cortes delgados de 3 pm. Se empleó el anticuerpo primario anti p63: Clon H-137de Santa Cruz Biotechnology, INC., en una dilución de 1:100. Luego, se utilizó el Kit: Super Sensitive One-Step Polymer- HRP Detection System, LP000-UL, Biogenex, CA, USA. El revelado se efectuó con diaminobencidina (DAB) y como tinción de contraste, la Hematoxilina. Este anticuerpo anti p63, marca principalmente núcleos y levemente, citoplasmas. Aquí se determinó el porcentaje de células cuyos núcleos mostraron el tono marrón dorado. Se observó inmunomarcación de células mioepiteliales y sus variedades: delimitando ductos, proliferadas e infiltrando el intersticio, hipertrofiadas, con atipías nucleares indicativas de malignidad, transformadas en células estrelladas de áreas mixoides, condrocitos de las áreas de cartílago y también se observó la marcación de osteocitos. Los valores promedio del porcentaje de p63 en los distintos tipos histológicos estudiados fueron: carcinomas simples: 15,83; complejos: 18,46; mixtos: 15,82; anaplásicos: 3 y carcinoma y mioepitelioma maligno: 30, no encontrándose diferencias significativas entre estos grupos. Tampoco se encontraron diferencias al analizar los distintos promedios de porcentajes de GM (GMI: 22 %; GMII: 13,51% y GMIII: 17,60%). Se realizaron curvas de Kaplan Meier con un valor de p 0,79. Queremos resaltar que nuestros resultados muestran a p63 marcando las células mioepiteliales y toda la transformación que se postula sucede con ellas en la histogénesis de las neoplasias complejas y mixtas, inclusive se ha observado positividad en condrocitos y osteocitos que no había sido informada por otros autores. Esta característica destaca a p63 entre todos los marcadores conocidos de células mioepiteliales. Y por otro lado, la ausencia de diferencias significativas entre los distintos grados de malignidad y las curvas de superviviencia, no nos permiten considerar a p63 como un marcador con posibilidades predictivas en cuanto a evolución, lo cual es propuesto por algunos autores.