Modelo de infección experimental en ratones y cobayos con anaplasma céntrale

Abstract

La Anaplasmosis de los bovinos es una enfermedad infecciosa, transmisible, de curso agudo, subagudo y crónico producida por una rickettsia, Anaplasma margínale. La profilaxis de la enfermedad implica el uso de una vacuna trivalente que contiene Anaplasma céntrale, obtenida de bovinos esplenectomizados. El objeto del presente trabajo fue instaurar la infección experimental de A. céntrale en animales de laboratorio. Se inocularon ratones y cobayos con eritrocitos bovinos infectados con el agente y se estudió el curso de la infección. Se utilizaron 2 lotes de ratones de la cepa CF1(n=4) y de la cepa Balb/c (n=4), de 20±2 g de peso y 10 semanas de edad. El inóculo se obtuvo a partir de bovinos infectados crónicamente, la sangre se extrajo con citrato de sodio al 3.8%. La cantidad inoculada fue de 1x107 eritrocitos infectados con A. céntrale (EIA), administrados por vía intraperitoneal. Para la infección experimental en cobayos se utilizó un n=2 animales de 400±10g y 16 semanas de edad, los que previamente fueron sometidos a esplenectomía de curso favorable y sin complicaciones. Estos fueron inoculados con 1x108 EIA, por vía intraperitoneal. Los animales fueron mantenidos en sectores separados, con el suministro diario de alimento y agua ad libítum. Las observaciones incluyeron aspectos físicos clínicos generales y parámetros fisiológicos. Se tomaron muestras de sangre periférica de cada uno de los animales en los días 0, 15, 30, 45 y 60, para determinar el número de eritrocitos infectados por campo, evidenciados en extendidos sanguíneos teñidos con Giemsa, a fin de evaluar el desarrollo de la infección. Asimismo, las muestras de sangre de todos los animales de experimentación fueron enviadas al laboratorio de Biotecnología de INT A- Castelar para la extracción de ADN y detección de A. céntrale por PCR anidada de punto final. No se observaron alteraciones clínicas en ninguno de los parámetros estudiados. Los resultados de la PCR evidenciaron ausencia de infección en los ratones CF1 y fue positivo en los Balb/c, a los 45 días, postinoculación. En el caso de los cobayos esplenectomizados la infección se detectó a los 30 días. Estos resultados fueron coincidentes con la observación de la rickettsia en los extendidos sanguíneos. Debido a que el periodo de prepatencia fue prolongado, en estos animales de experimentación se continúan muestreando para determinar la presencia o ausencia de la rickettsia. La infección experimental en ratones Balb/c y cobayos es posible, sería interesante ajustar la dosis inoculante a fin de poderlos utilizar como modelos de infección para probar nuevas drogas para el control de la anaplasmosis.