Determinación de la susceptibilidad de la cepa de rhipicephalus microplis de referencia sensible frente a ivermectina
Fecha
2018Autor
Barbieri, Flavia
Bogado, Matías
Del Rio Álvarez, Florencia
Koudela, Julia
Ríos, Elvio Eduardo
Lozina, Laura
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
Desde el inicio de la ganadería bovina en Argentina, las garrapatas fueron
catalogadas como un problema de relevancia para el desarrollo de la actividad. La mayor parte
de las pérdidas económicas son ocasionadas por Rhipicephalus (Boophilus) microplus. El
Centro de Investigaciones de Fármacos Garrapaticidas, dependiente de la Facultad de Ciencias
Veterinarias de la UNNE, tiene como fin el estudio de este ectoparásito y en este contexto, se
mantiene en condiciones de laboratorio en forma continua la cepa de R. microplus de referencia
sensible. Su importancia radica, en que permite la estandarización de protocolos de trabajo para
la realización de bioensayos en tareas de vigilancia epidemiológica para el monitoreo de la
evolución de la resistencia generada a campo a los distintos acaricidas. El objetivo del presente
trabajo fue determinar su perfil de susceptibilidad a la Ivermectina, obteniendo los valores de
dosis letal 50 (DL50), y dosis letal 99 (DL99) mediante la prueba de paquete larvario. La técnica
utilizada fue la de Stone & Haydock (1962), empleando droga de grado técnico con pureza del
97% y larvas de entre 14 a 21 días de edad. En primer lugar, se pesó la cantidad suficiente de
droga técnica para obtener la solución madre, disolviéndola con el solvente preparado (33.33 ml
de tricloroetileno y 16.67 ml de aceite de oliva) y se llevó a un volumen final de 50 ml.
Posteriormente y con diluciones seriadas a la mitad se obtuvieron las diferentes
concentraciones (1,0.5, 0.25, 0.12,0.06 %), las que fueron utilizadas para impregnar papeles
Whatman N°1 de tamaño 8.5 * 7.5 con 0,67 ml de cada dilución, por triplicado.Los papeles se
impregnaron de tal manera de obtener una concentración máxima en la que se logre una
mortandad de 100% de las larvas y una concentración mínima donde haya un 10% de
mortandad aproximada, de acuerdo a la metodología utilizada en los métodos “probits”. Luego
de 24 horas de secado a temperatura ambiente, cada papel es llenado con aproximadamente 100
larvas, y se forman paquetes cerrados con broches. Los mismos fueron colocados en bandejas y
se incubaron a 27°C y 80% de humedad durante 24 horas.Transcurrido ese tiempo, se procedió
a la apertura individual de los sobres y al conteo de las larvas vivas y muertas. Seis repeticiones
fueron realizadas para cada dilución con la finalidad de obtener un resultado estadísticamente
aceptable. Los valores obtenidos en cada prueba fueron ingresados en un programa POLO PC,
con los que se obtuvieron la DL50 y la DL99, que fueron de 0,06% y 0,5% respectivamente. Dos
veces el valor de la DL99 es considerada como dosis discriminatoria (DD). La importancia de
ésta radica en que se puede utilizar como técnica de screening para el diagnóstico de la
resistencia generada a campo a este principio activo, informando como población resistente
aquella que presente larvas vivas luego de su exposición a la misma.