Sensibilidad in vitro de Malassezia furfur y Malassezia sympodialis frente a antifúngicos de uso clínico
Fecha
2014-06Autor
Cattana, María Emilia
Sosa, María A.
Fernández, Mariana Soledad
Giusiano, Gustavo Emilio
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
Las especies de Malassezia son miembros de la micobiota cutánea normal del hombre y otros animales de sangre caliente. Se caracterizan por ser lipofílicas y la mayoría son lipo-dependientes debido a un defecto para sintetizar ácidos grasos. Además, son agentes de afecciones cutáneas y sistémicas. Las formas sistémicas suelen tener desenlace fatal, por lo que es prioritario conocer el perfil de sensibilidad in vitro frente a los antifúngicos. El estándar M27-A3 del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) es aplicable a Candida spp. y a Cryptococcus neoformans para determinar la sensibilidad in vitro, pero no lo es para Malassezia spp.; a la fecha no existen métodos estándar para las levaduras lipofílicas. El objetivo fue determinar la sensibilidad in vitro de dos especies de Malassezia frente a cinco antifúngicos de uso clínico.
Se estudiaron 59 cepas del género Malassezia, 39 Malassezia furfur (M. furfur) y 20 M. sympodialis, previamente identificadas por métodos convencionales y moleculares. Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) según el M27-A3 con modificaciones para asegurar el desarrollo de los microorganismos: el medio RPMI 1640 fue suplementado con glucosa, peptona, bilis de Buey, glicerol y Tween 40 y 80. Las placas se incubaron a 32ºC y la lectura fue visual a las 96 horas. Se evaluaron: fluconazol (FZ), ketoconazol (KZ), voriconazol (VZ), itraconazol (IZ) y anfotericina B (AB). Al no existir puntos de corte para Malassezia spp. no se asignaron las categorías de sensible o resistente para los aislamientos; se calculó la media geométrica (MG) y el rango para cada antifúngico.
Las modificaciones realizadas al M27-A3 permitieron el desarrollo óptimo de las especies estudiadas. La lectura e interpretación de la CIM pudo ser realizada a las 72 horas de incubación. Los rangos de CIM (μg/mL) obtenidos para M. furfur y M. sympodialis respectivamente fueron: FZ: ≤0,13-≥64 y ≤0,13 -4; KZ: ≤0,03-0,25 y ≤0,03-0,06; IZ: ≤0,03-0,13 y ≤0,03-0,06; VZ: ≤0,03-0,5 y ≤ 0,03-0,06; AB: 0,25-4 y 0,13-4. La MG fue (μg/mL) FZ: 3,29 y 0,58; KZ: 0,04 y 0,03; IZ: 0,04 para ambas especies; VZ: 0,08 y 0,04; AB: 1,02 y 0,56.
El medio RPMI 1640 suplementado permitió un crecimiento adecuado de las dos especies y a las 72 horas se obtuvo una lectura clara de la CIM. M. furfur y M. sympodialis mostraron diferente perfil de sensibilidad frente a los antifúngicos testeados. En general, los antifúngicos ensayados fueron más activos in vitro frente a M. sympodialis.
Para ambas especies, el KZ, el IZ y el VZ fueron las drogas más activas y con menor variabilidad de CIMs intra e interespecies. Por el contrario, FZ y AB mostraron CIMs más elevadas y con mayor variabilidad intra e interespecies. Estos hallazgos refuerzan la importancia, no solo de realizar la correcta identificación, sino también, de estudiar en cada aislamiento, el perfil de sensibilidad in vitro frente a los antifúngicos.