Deshidratación de eritrocitos parasitados con Babesia spp como alternativa inmunoprofiláctica. Resultados preliminares
Dehydration of erythrocytes parasitized with Babesia spp as an immunoprophylactic alternative. Preliminary results
Fecha
2022-04-27Autor
Del Río Álvarez, Florencia
Peichoto, María Elisa
Palma, Santiago Daniel
Maletto, Belkys Angélica
Guidoli, Marcos Gabriel
Huber, Laura Beatriz
Lozina, Laura Analía
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
La inmunoprofilaxis de la babesiosis bovina cuenta con dos presentaciones de una
vacuna viva atenuada (fresca y ultracongelada). Pese a ser efectivas, su durabilidad, así
como las condiciones necesarias para su traslado y manipulación, las hacen poco prác-
ticas. La incorporación de una tercera presentación, utilizando merozoitos deshidratados
como inmunógenos, constituye una innovadora alternativa, que combina practicidad y
estabilidad en el tiempo. El objetivo del presente trabajo fue ensayar procesos de deshi-
dratación y sustancias criopreservadoras y rehidratantes. Con este fin, eritrocitos alta-
mente parasitados con Babesia bovis y B. bigemina fueron sometidos a dos técnicas de deshidratación: liofilización y secado por aspersión. A su vez, para el proceso de
liofilización se ensayaron varios lioprotectores: Dimetilsulfóxido, Glicerol, Dextrosa y
Polivinilpirrolidona (PVP). El único que logró un polvo adecuadamente deshidratado, de
aspecto cristalino y quebradizo al tacto fue la PVP. Posteriormente, los eritrocitos obteni-
dos por ambas técnicas fueron reconstituidos con soluciones de sacarosa (0.25, 0.5, 1 M),
solución salina 0.9%, solución Vega y Martínez, buffer fosfato y agua destilada. La
microscopía óptica con objetivo de inmersión evidenció que el mejor reconstituyente
tanto para los glóbulos rojos liofilizados como para los secados por aspersión fue la
solución de sacarosa 0.25 M, pudiéndose apreciar un alto número de glóbulos rojos
liofilizados y reconstituidos con morfología conservada. Extrapolando este comporta-
miento a los hemoparásitos en estudio, resultaría promisoria su aplicación como
inmunógenos. Immunoprophylaxis for bovine babesiosis has two presentations of a live attenuated
vaccine (fresh and deep-frozen). Despite being effective, their durability, as well as the
conditions necessary for their transfer and handling, make them impractical. The
incorporation of a third presentation, using dehydrated merozoites as immunogens,
constitutes an innovative alternative, which combines practicality and stability over
time. The objective of this work was to test dehydration processes and cryopreservative
and rehydrating substances. For this, erythrocytes highly parasitized with Babesia bovis
and B. bigemina were subjected to two dehydration techniques: lyophilization and spray
drying. In turn, for the lyophilization process, several lyoprotectants were tested:
Dimethylsulfoxide, Glycerol, Dextrose and Polyvinylpyrrolidone (PVP). The only one
that achieved a properly dehydrated powder, crystalline in appearance and brittle to the
touch was the PVP. Subsequently, the erythrocytes obtained by both techniques were
reconstituted with sucrose solutions (0.25, 0.5, 1 M), 0.9% saline solution, Vega y Martínez
solution, phosphate buffer and distilled water. Optical microscopy with an immersion
objective showed that the best reconstituent for both lyophilized and spray-dried red
blood cells was the 0.25 M sucrose solution, showing a high number of lyophilized and
reconstituted red blood cells with preserved morphology. Extrapolating these results to
the haemoparasites under study, their application as immunogens would be promising.
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