Evaluación del efecto inmunomodulador de la noradrenalina sobre monocitos humanos como modelo de estudio en el tratamiento de la sepsis
Resumen
La sepsis es una disfunción orgánica potencialmente mortal causada por una respuesta desregulada del huésped a la infección.
Aunque su etiología es desconocida, se sabe que sobreviene a una inadecuada respuesta a la infección y puede conducir a un fallo
multiorgánico. Este cuadro puede comprender rasgos tanto proinflamatorios como inmunosupresores, y si bien el fenotipo
hiperinflamatorio puede tener claros efectos nocivos, su atención se ha desplazado, en parte, hacia el papel perjudicial de la
inmunosupresión inducida por sepsis, considerando que esta inmunoparálisis se asocia a un pronóstico desfavorable. La
noradrenalina (NA) es el principal tratamiento actual de estabilización hemodinámica, administrada prácticamente a todos los
pacientes con shock séptico y otras afecciones inflamatorias sistémicas graves. Si bien numerosos trabajos en distintos modelos
celulares muestran los efectos antiinflamatorios in vitro primordiales de la NA, existen controversias dependientes del modelo usado.
Los datos in vivo en animales sobre los supuestos efectos inmunomoduladores de la norepinefrina son muy escasos y los datos in
vivo en humanos son inexistentes.
En el presente trabajo se evaluaron los efectos inmunomoduladores de NA en un modelo in vitro de macrófagos murinos, con el
objeto de generar información que determine el rol de NA en el tratamiento de esta afección. Los macrófagos se obtuvieron por
diferenciación celular en cultivo primario, a partir de precursores de médula ósea murina. Para determinar la concentración de trabajo
de NA y citoquinas, se usó el Kit de viabilidad luminiscente CellTiter (Promega). Posteriormente se utilizó RT-qPCR para evaluar la
expresión de genes impliados en la respuesta farmacológica a NA en macrófagos.
Los resultados obtenidos muestran que concentraciones de NA superiores a 10 μM inducen reducción de la viabilidad de macrófagos
en 24 h de exposicion. En orden de evaluar las propiedades inmunomoduladoras per se de NA, las células macrofágicas obtenidas
fueron pretratadas con NA (10 mM) por 3 h y posteriormente desafiadas en diferentes condiciones proinflamatorias. Luego, los
macrófagos fueron incubados por 24 h a diferentes concentraciones de NA, y se realizó la cuantificación relativa de la expresión del
ARNm de citoquinas proinflamatorias y antiinflamatorias, utilizando GAPDH como gen housekeeping. NA no indujo reducción
significativa de la liberación IL-23 o TNF-alfa en las dos condiciones proinflamatorias ensayadas. En contraste, se observó una
prominente disminución en la expresión de IL-6 por acción de NA. Estos resultados preliminares serían compatibles con la idea de
una inducción de polarización a Macrófagos M2, que podría replicarse en el contexto in vivo de pacientes sépticos.
La profundización de esta línea de investigación, particularmente centrada en el mecanismo de acción de NA (u otras catecolaminas)
sobre receptores adrenérgicos macrofágicos, ha de aportar información útil que dilucide la inducción de inmunoparálisis en células
clave del sistema inmune (Células presentadoras de antígeno, Células B o T) y simultáneamente, mejore la implementación
farmacológica de uso de NA en pacientes con distintos cuadros o fases de sepsis.