Hemoplasmosis porcina detectada en granjas de Argentina mediante un nuevo ensayo de PCR anidada

Abstract

La hemoplasmosis porcina o anemia infecciosa de los cerdos es una enfermedad de distribución mundial causada por Mycoplasma suis y Mycoplasma parvum. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de infecciones subclínicas con M.suis-M. parvum en cerdos provenientes de granjas de la Provincia de Buenos Aires, Argentina, por medio de una nueva PCR anidada. Para el diseño de los primers se utilizaron las secuencias del gen ribosomal 16S de los hemoplasmas disponibles en el GenBank. La técnica fue estandarizada con muestras de porcinos positivos a hemoplasmas seleccionados mediante la observación en frotis sanguíneos teñidos conMayGrünwald-Giemsa (MGG). Se analizaron un total de 482 muestras de sangre de cerdos, un 32% (154/482) de los frotis sanguíneos fueron positivos a M. suis o M. parvum con la tinción de MayGrünwald-Giemsa y de estas 154 muestras un 47% (72/154) fueron positivas por PCR. Por secuenciación se confirmó que los productos amplificados con estos primers siempre mostraron identidad con M. suis así como con M. parvum, validando su especificidad de especie y resaltando la no amplificación con ningún otro hemoplasma. El diseño de esta técnica fue el primero realizado en nuestro país para identificar M. suis-M. parvum. Considerando los avances en el conocimiento del genoma de los hemoplasmas a nivel mundial, se deberá seguir trabajando en la estandarización de nuevas técnicas de diagnóstico de hemoplasmosis porcina en Argentina.

Swine hemoplasmosis or swine infectious anemia is a worldwide distribution disease caused by the hemotropic mycoplasmas Mycoplasma suis and Mycoplasma parvum. The aim of this study was to determine the presence of M. suis-M. parvum infection in subclinical pigs from herds of Buenos Aires province, Argentina, by means of new nested PCR. The PCR assay primers were designed based on the 16S ribosomal gene sequences of swine hemoplasmas available at GenBank. To standardize the assay, pig blood samples positive for hemoplasma by May Grünwald-Giemsa (MGG) stained blood smears were used. A total of 482 pig blood samples were analyzed. A 32% (154/482) of MGG stained blood smears were positive to M. suis o M. parvum. From these 154 samples, 47% (72/154) were positive by PCR. Sequences of PCR products amplified with these primers always showed identity with M. suisor M. parvum, validating their specificity and highlighting the unspecific amplification with hemoplasmas of other species. This is the first assay designed in Argentina to identify M. suis and M. parvum. However, considering the advances in the knowledge of the genome of hemoplasmas worldwide, further studies should be performed to standardize new assays for the diagnosis of swine hemoplasmosis in Argentina.