Potencia necrotizante del veneno de ejemplares juveniles de bothrops alternatus (serpentes : viperidae : crotaline) evaluada en músculo de ratón
Resumen
En este Trabajo Final de Grado se evaluó bioquímica y biológicamente el veneno de serpientes juveniles
de la especie Bothrops alternatus del nordeste argentino. Para ello se realizaron ensayos in vivo e in vitro al
veneno de ejemplares con longitud rostro-cloaca o SVL(
*
) de ~30 cm.
El veneno entero fue evaluado en su potencia letal por la vía intramuscular. Se calculó, con base en la
metodología descripta por Randhawa (2009), la LD50 (i.m.) que arrojó un valor de 6.9 µg/g. Además, la acción
miotóxica local fue estudiada y analizada bajo MO a fin de observar las lesiones deletéreas sobre las fibras
musculares de gastrocnemio de ratón. Se corroboró mionecrosis en el sitio de la inoculación más manifiesta
luego de 3 h, observándose además zonas de desorganización fibrilar, edema e intensa hemorragia. Esta
capacidad miotóxica fue corroborada in vitro cuando se utilizó la línea muscular C2C12, específica para
visualizar la acción de familias de proteínas de fosfolipasas A2 y metaloproteasas típicas de la intoxicación
botrópica.
Además, el veneno de individuos juveniles exhibió actividad hemolítica indirecta sobre glóbulos rojos y
acción coagulante, efectos principales involucrados en la fisiopatología del envenenamiento por Bothrops.
Los antivenenos de uso comercial antibotrópico y bivalente, producidos en caballos a partir de dosis
subletales de veneno completo de ejemplares adultos en todos los casos, presentaron una sola banda de
precipitación frente al veneno de juveniles. Sin embargo, se observaron dos bandas nítidas de precipitación
cuando se los enfrentó al veneno de serpientes adultas. Esta respuesta diferencial podría ser como
consecuencia de la expresión de isoformas o variantes de las proteínas expresadas en las juveniles, que
luego se modificarán en la composición venómica de las serpientes adultas. En este sentido, es natural que
algunas características del envenenamiento botrópico puedan desaparecer o reducirse a lo largo del
desarrollo del animal.
Todos estos hallazgos ponen en evidencia que la diversidad ontogenética de los venenos botrópicos
puede verse reflejada en su actividad biológica en la presa y en el envenenamiento animal y/o humano.
Por ello, resulta de interés ampliar la caracterización de veneno de serpientes juveniles del género
Bothrops dado que la variación intraespecífica es particularmente notoria en las especies que poseen una
distribución geográfica muy amplia y ocurren cambios importantes en la composición de sus venenos durante
la transición desde su etapa neonatal a la juvenil y adulto