Caracterización bioquímica del veneno de Crotalus durissus terrificus de diferentes regiones de Argentina

Abstract

En América del Sur existen diversas especies de serpientes que pueden provocar un envenenamiento ofídico grave, entre ellas Crotalus durissus terrificus, (serpiente cascabel), responsable de la mayor parte de las muertes por accidente ofídico en Sudamérica. En Argentina, esta especie de importancia médica sanitaria es responsable del 2% de los accidentes ofídicos. Su veneno posee actividad neurotóxica y miotóxica sistémica y a diferencia de otras serpientes de la familia Viperidae, carece de actividad proteolítica por lo que no origina alteraciones hemorrágicas. Diversas investigaciones describen la variación en las características bioquímicas de los venenos en ejemplares de Crotalus proveniente de diferentes regiones geográficas de Brasil, con las implicaciones clínicas y terapéuticas que esto conlleva. Estudios recientes identificaron los principales componentes del veneno crotálicos de especímenes de Corrientes crotamina, convulxina, serino proteasas o enzima semejante a trombina, L-aminoácido oxidasa y fosfodiesterasa y el complejo crotoxina formado por fosfolipasas y crotapotin. En el presente trabajo se caracterizaron venenos de especímenes provenientes de diferentes regiones fitogeográficas de Argentina, utilizando venenos obtenidos de especímenes adultos de Crotalus durissus terrificus de diferentes regiones. Se realizaron pruebas bioquímicas para caracterizar los venenos, incluyendo la cuantificación de proteínas, Hemólisis Radial Indirecta, Actividad coagulante, Actividad fosfodiesterasa, Actividad L-amino oxidasa, Electroforesis SDS-PAGE y la evaluación de la citotoxicidad. Cada experimento se replicó tres veces y los resultados se presentaron en términos de media ± desviación estándar. Se aplicó un análisis estadístico a los resultados obtenidos. Para llevar a cabo los ensayos pertinentes, se contó con un total de ocho muestras de veneno obtenidas de especímenes adultos de Crotalus durissus terrificus, provenientes de diversas regiones fitogeográficas de Argentina, distrito de las selvas mixtas (Selva Paranaense) (M4 y 7), distrito oriental húmedo (Provincia chaqueña) (M1, 6, 5 y 8) y el distrito del cardonal (Provincia de monte) (M2 y 3). Los venenos fueron disecados y conservados a -20oC, posteriormente fueron diluidos en una solución de tampón de fosfatos con un pH de 7,2 al momento de su utilización.