Evaluación citotóxica en cultivos de células gliales expuestos al extracto de Prosopis flexuosa

Abstract

Especies del género Prosopis, conocidas como Algarrobo, son consideradas una fuente de alimento para animales debido a su alto valor nutricional. Sin embargo, también se han registrado intoxicaciones espontaneas en rumiantes. El objetivo del presente trabajo fue contribuir al conocimiento de la toxicología animal, mediante el estudio fitoquímico del extracto total (ET) de Prosopis flexuosa, junto a ensayos in vitro. Se cuantificaron los alcaloides piperidínicos (juliprosopina y juliprosina) a partir de un extracto clorofórmico de vainas de P. flexuosa mediante HPLC-HRMS y se realizó el fraccionamiento del extracto total (ET) por Cromatografía flash en columna. Para los ensayos in vitro se empleó la línea celular C6 de glioma murino (ATCC:CCL-107™) y se adicionaron diferentes concentraciones del ET (5- 50 pg/ml). Luego de 48 h de incubación a 37°C y 5% CO2, la viabilidad celular se cuantificó por tinción con el colorante cristal violeta y se determinó la concentración citotóxica 50 (CC50). Para el análisis morfológico se empleó la tinción de Rosenfeld y para la detección inmunocitoquímica se utilizó el anticuerpo GFAP. Los resultados evidenciaron que el ET de P. flexuosa disminuyó la viabilidad celular de manera dosis dependiente, siendo la CC50 de 35,68 pg/mL. Las alteraciones morfológicas se observaron en células tratadas con 10 y 15 pg/mL de ET y a la inmunocitoquímica, los niveles de expresión de GFAP disminuyeron en células tratadas con 20 pg/ml (21,14±3,7 %) de ET. Los estudios in vitro realizados evidenciaron efectos citotóxicos y alteraciones morfológicas sobre la línea C6 expuestos al ET de P. flexuosa.