Estandarización de la Reacción de PCR en tiempo real para el diagnóstico de chagas congénito

Abstract

En este trabajo se estandarizó una PCR en tiempo real para detectar ADN satelital de T. cruzi, con el objeto de que sea aplicada a la detección de Chagas Congénito en un laboratorio de Salud Pública de la Provincia del Chaco. Dicho trabajo de estandarización comprendió desde el diseño del laboratorio de Biología Molecular, hasta la obtención de los resultados finales. En el proceso también se prepararon diluciones artificiales de epimastigotes de cultivo (clon CL-Brener), con el objeto de construir la curva estándar que nos permita validar la linealidad del ensayo de qPCR. También se implementó un sistema de control externo de calidad para PCR en tiempo real desarrollado en el laboratorio de Biología Molecular del INP-Fatala Chaben. Se recibieron paneles de control para realizar los métodos de PCR implementados en el laboratorio con el objeto de controlar todos los procesos transferidos. Por último se procesaron muestras clínicas de individuos con Chagas crónico, proporcionadas por el laboratorio de Biología Molecular del Instituto de Medicina Regional de la UNNE de manera de cuantificar la carga parasitaria de las mismas en sangre periférica y compararlas con los valores obtenidos anteriormente en este último laboratorio, como un proceso más de control interlaboratorial.