http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/77 2026-05-20T19:40:47Z http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60283 Desarrollo de un procedimiento de multiplicación vegetativa y crioconservación aplicable al programa de mejoramiento genético de Pinus elliottii var. elliottii × Punis caribaea var. hondurensis Ayala, Lilian Patricia Elizabeth Desde su introducción a la Argentina en la década del 80, el híbrido entre Pinus elliottii var. elliottii y Pinus caribaea var. hondurensis, ha demostrado atributos de forma, adaptabilidad y crecimiento deseables. Las expectativas generadas despertaron el interés del sector forestoindustrial poniendo de manifiesto la necesidad de contar con suficiente material que atienda la creciente demanda. Sin embargo, la baja producción de semillas del híbrido restringe su expansión comercial, por lo que es necesario asegurar una crioconservación eficiente y un protocolo de propagación que asegure su estabilidad genética. Los embriones cigóticos maduros se cultivaron en medio Murashige y Skoog (1962) reducido a la mitad de su concentración (½ MS) con 6-benciladenina (BA) y tidiazurón (TDZ). Tras 45 días en cultivo, la mayor tasa de regeneración (86.7±8.8%) y el máximo número de yemas diferenciadas por explante (15.5±2.8) se obtuvieron a partir de embriones cultivados en ½ MS suplementado con sacarosa 0.09 M y adicionado con 0.5 μM de cada citocinina. El empleo de la misma formulación nutritiva, gelificada con Phytagel® (3.5 g‧L-1) y libre de reguladores de crecimiento en recipientes provistos de ventilación asistida, promovió la elongación de las yemas adventicias diferenciadas. Posteriormente, el 73±6.7% de los brotes produjeron raíces tras el pretratamiento en una solución con 1.25 mM de ácido indol-3-butírico (IBA) durante 5 min y el cultivo en MS diluido 4 veces, semisólido (Phytagel® 4 g‧L-1), con sacarosa (0.045 M). La criopreservación de los embriones cigóticos aplicando la técnica de desecación y la posterior inmersión directa en nitrógeno líquido no afectó la tasa de regeneración, permitiendo prolongar el tiempo de almacenamiento del explante. Las vitroplantas se transfirieron con éxito a condiciones ex vitro. Teniendo en cuenta que el déficit hídrico es la principal tensión durante el establecimiento de la plantación, se llevó a cabo un experimento en condiciones controladas para determinar la aptitud de las plantas propagadas in vitro para superar esta situación desfavorable. Finalmente, los estudios de campo evaluaron la tasa de sobrevivencia y el crecimiento de las plantas de 16 meses de edad durante la implantación del bosque. Nuestros resultados indicaron que, durante la fase de establecimiento del dosel comercial, la sobrevivencia y crecimiento de las plantas provenientes de organogénesis es comparable a aquellas obtenidas por germinación de semillas y macropropagación. Además, el análisis de marcadores inter-simple sequence repeat (ISSR) reveló la uniformidad genética entre las plantas cultivadas in vitro, demostrando la fiabilidad y validez del procedimiento. De este modo, los protocolos de regeneración y crioconservación desarrollados constituyen una valiosa alternativa para los programas de mejora genética y propagación comercial de Pinus elliottii var. elliottii × Pinus caribaea var. hondurensis.; Since its introduction to Argentina in the 1980s, the hybrid between Pinus elliottii var. elliottii and Pinus caribaea var. hondurensis has demonstrated desirable attributes of form, adaptability and growth. The expectations generated aroused the interest of the forestry-industrial sector, highlighting the need for sufficient material to meet the growing demand. However, the low seed production of the interspecific hybrid restricts its commercial expansion, making it necessary to ensure efficient cryopreservation and a propagation protocol with no genetic variability. Mature zygotic embryos (MZEs) were cultured in half-strength Murashige and Skoog (½ MS) medium containing 6-benzyladenine (BA) and tidiazurón (TDZ). After 45 days in culture, the highest rate of regeneration (86.7±8.8%) and the maximum number of differentiated buds per responsive explant (15.5±2.8) were achieved from explants cultivated on ½ MS enriched with sucrose (0.09 M), BA and TDZ (0.5 μM each). The same nutrient formulation gelled with gellan gum (3.5 g‧L1) and free of growth regulators in containers provided with forced ventilation culture was used for shoot elongation. Subsequently, 73±6.7% of shoots produced roots after pretreatment with 1.25 mM indole-3-butyric acid solution for 5 min and culture on quarter-strength MS with gellan gum (4 g‧L-1) and sucrose (0.045 M). Cryopreservation of zygotic embryos using a simple desiccation step and a direct immersion into liquid nitrogen did not affect regeneration and would enhance embryo storage duration. The regenerated plantlets were successfully transferred to ex vitro conditions. Considering that water deficit is the major strain during forest establishment, a controlled experiment was carried out to determine the competence of plantlets to overcome this stress. Next, field studies assessed the survival rate and growth of 16-month-old plants. Our results indicated that the field performance of tissue-culture-derived plants is similar to seedlings and rooted cutting plants. Additionally, inter-simple sequence repeat marker analysis revealed the genetic uniformity among the in vitro raised plants, demonstrating the reliability and validity of the procedure. Thus, the developed regeneration and cryopreservation protocol for mature zygotic embryo explants is a valuable alternative for breeding programs and commercial Pinus elliottii var. elliottii × Pinus caribaea var. hondurensis propagation. 2024-01-01T00:00:00Z http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60222 Distribución potencial del género Lobizon (Araneae: Lycosidae) en Sudamérica Mattern, Mariela Soledad Lycosidae es una familia de arañas muy diversa, actualmente con 135 géneros y 2479 especies distribuidas por todo el mundo. Se caracterizan principalmente por la disposición ocular, ocho ojos dispuestos en tres filas, la primera consta de cuatro ojos pequeños dispuestos casi en línea recta, la segunda con dos ojos centrales considerablemente grandes, y la tercera con dos ojos pequeños situados lateralmente. El género Lobizon abarca las arañas vulgarmente conocidas como arañas lobo, se compone de cinco especies registradas únicamente en Argentina, estas son: L. corondaensis (Mello-Leitão, 1941), L. minor, (Mello-Leitão, 1941), L. humilis (Mello-Leitão, 1944), L. ojangureni y L. otamendi; distribuidas en las provincias del norte y centro de Argentina que son Corrientes, Chaco, Formosa, Salta y Buenos Aires. No obstante, existen algunos reportes de ocurrencia del género en otras provincias limítrofes. Teniendo en cuenta que la distribución de las especies es un tema fundamental en la biogeografía y en la ecología, ya que permite comprender como las especies se distribuyen en el espacio y tiempo; el objetivo de esta tesis es conocer la distribución potencial del género Lobizon en Sudamérica, a partir de los datos obtenidos en la recopilación bibliográfica y en los registros en GBIF. Además, se determinarán los sitios de mayor abundancia de las distintas especies mediante la determinación de los especímenes depositados en la colección CA-UNNE del laboratorio de Biología de Artrópodos, cuya procedencia corresponde a diferentes campañas realizadas en el nordeste argentino. Para el análisis de distribución potencial se utilizó el algoritmo MaxEnt en RStudio Team. Como resultado se obtuvieron proyecciones geográficas del nicho ecológico del género Lobizon en el centro y noreste de Argentina, en Uruguay y Sur de Brasil. Este estudio ha permitido reconocer que el centro y noreste de Argentina, Uruguay y Sur de Brasil, tienen características climáticas similares para el nicho ecológico de Lobizon. 2025-01-01T00:00:00Z http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60033 Acción in vitro de moléculas orgánicas como inhibidores de las metaloproteinasas del veneno de Bothrops diporus Schwesig, Ingrid Denise Las serpientes del género Bothrops, son las responsables del mayor número de accidentes ofídicos en Argentina, cuyo envenenamiento se caracteriza por efectos proteolíticos, coagulantes y hemorrágicos. Bothrops diporus, Cope, 1862 (“yarará chica”) corresponde a una de las principales especies de importancia sanitaria en la región. El proteoma de este veneno comprende toxinas pertenecientes a catorce familias, siendo las más abundantes las metaloproteinasas de venenos de serpientes (SVMPs). El tratamiento de los accidentes ofídicos consiste en la administración del antiveneno específico. En los últimos años se ha propuesto la terapia combinatoria, anticuerpos e inhibidores (moléculas orgánicas pequeñas). En este trabajo se evaluó el potencial de tres moléculas orgánicas (MOs) [ácido ascórbico (AA), rojo de alizarina S (Az) y quercetina (Q)] para inhibir la actividad proteolítica in vitro del veneno de B. diporus. Se prepararon mezclas de veneno: MOs y se ensayaron dos métodos cualitativos, electroforesis en geles de poliacrilamida y zimografía y, dos cuantitativos, placas de agar-leche y actividad azocaseinolítica, para evaluar la inhibición por método de pre-incubación. Se realizó, el ensayo de actividad hemolítica indirecta para medir si estas moléculas eran capaces de inhibir las fosfolipasas A2 (PLA2s), segunda familia más abundante de este veneno. Se realizó un análisis densitométrico (ImageJ) y estadístico mediante ANOVA (Infostat). El análisis electroforético evidenció que las tres moléculas mostraron un efecto protector parcial frente a la degradación proteolítica de la caseína. Se pudo observar que tanto AA como Q duplicaron la intensidad de la banda αs1 de la caseína (αs1-CN) respecto al veneno. Sin embargo, la relación (masa:masa, m:m) de veneno:AA utilizada fue 10 veces más alta a la de veneno:Q. Asimismo, la relación más alta de veneno:Az (1:20), mostró que la intensidad dicha banda aumentó 26 veces respecto al control. Este resultado muestra un efecto inhibitorio mayor de Az, seguido de Q y AA. Se observaron dos bandas claras de degradación, que corresponden a zonas donde se posicionaron las SVMPs del veneno, por zimografía. Si bien se puede ver una leve disminución de las bandas en presencia de Q, no fue posible determinar una diferencia significativa por densitometría. Por otro lado, el método cuantitativo en placas de agar leche, mostró que la mayor inhibición observada fue también con Az, lo que permitió calcular la Concentración Inhibitoria 50 (CI50), dando un valor tres veces mayor (CI50= 11,1 mM) al previamente reportado para el veneno de B. alternatus con Az (CI50= 3,6 mM). El mayor valor de CI50 obtenido para B. diporus, probablemente se deba a que la Az se una mejor al sitio catalítico de las SVMPs PIII (mayoritarias en el veneno de B. alternatus) que al de la clase PI. Sin embargo, este método resultó poco sensible para evaluar AA o Q, debido a variaciones de pH o solubilidad de las mezclas. La actividad azocaseinolitica, permitió ensayar relaciones más altas de veneno:Q (1:0,75), observándose una reducción del 42% de la actividad del veneno. Sin embargo, este método no resultó adecuado para Az y AA debido a interferencias metodológicas. Finalmente, se evaluó la inhibición de la actividad hemolítica indirecta del veneno de B. diporus, sin observarse inhibición significativa con ninguna de las moléculas, bajo las condiciones ensayadas. Si bien estudios previos reportaron efectos inhibitorios de Q y AA sobre PLA₂s de otros venenos, estas discrepancias podrían deberse a variaciones interespecíficas en la composición y tipo de isoformas. En este sentido, el estudio de compuestos naturales (o sintéticos) como potenciales inhibidores de las SVMPs, abre un nuevo abanico de posibilidades para explorar alternativas para el tratamiento complementario de los accidentes ofídicos. 2025-01-01T00:00:00Z http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/60032 Regeneración leñosa post-incendio en el Parque Provincial San Cayetano, Corrientes (Argentina) Rodríguez Arsuaga, Julieta Denisse La ecología del fuego estudia la dinámica de los incendios y los efectos que éste produce sobre el ambiente. Durante el 2020, debido a ciertas condiciones climáticas y a factores antrópicos, se registró un aumento de incendios en Argentina. En la Provincia de Corrientes, el Parque Provincial San Cayetano (PPSC) sufrió una serie de severos incendios durante agosto y octubre de ese año, los cuales afectaron gran parte de su superficie, produciendo diferentes efectos sobre la fauna y la flora. Después de un año de éstos disturbios, observaciones in situ mostraron que, a pesar de las alteraciones ocurridas por los incendios, la vegetación del PPSC comenzó a rebrotar y regenerarse, al igual que ecosistemas similares. Este estudio fue propuesto con el objetivo de analizar la regeneración de especies leñosas en el PPSC en relación a diferentes grados de severidad del quemado (alta, moderada alta, moderada baja y baja) en las áreas afectadas. Para ello, se utilizaron herramientas de teledetección y Sistemas de Información Geográfica. Luego, se seleccionaron sitios de bosque con diferentes severidades y se delimitaron tres transectas de 30x10m para cada grado de severidad previamente localizado en el mapa. En cada transecta se censó la especie, altura, diámetro a la altura de pecho, estrato, cobertura del dosel, supervivencia y regeneración. También se calcularon indicadores de diversidad utilizando Shannon-Wiener para la diversidad alfa y el índice de Jaccard para la diversidad beta. De esta manera, se conoció que las extensiones de los incendios ocurridos durante el año 2020 en el PPSC fueron de 36,32 ha (46 % del PPSC) de las cuales la mayor parte sufrió una severidad moderada baja. Además, se registraron 64 especies vegetales leñosas con 1820 individuos en total, de los que se obtuvieron datos de altura, diámetro y evidencia de rebrote o regeneración. La supervivencia fue del 83,7 % y la capacidad de regeneración del 50,66 % para todas las leñosas censadas. Los índices de diversidad alfa para cada cada tratamiento fue: testigo H’= 2,164, severidad alta H’=2,262, moderada alta H’= 2,089, moderada baja H’= 2,33 y baja H’= 2,359; para la diversidad beta el índice de Jaccard resultó mayor entre la severidad moderada baja y severidad baja IJ= 0,59375. La cobertura promedio del dosel para cada caso fue: testigo 83,33%, severidad alta 11,67 %, moderada alta 63,33 %, moderada baja 71,67 % y baja 81,87 %. A su vez, se observaron diferencias significativas entre la cobertura del dosel y la severidad de los incendios. Es por ello, que se concluye que la severidad de los incendios tiene un efecto diferencial en los bosques y su regeneración, aquellos bosques disturbados en severidades moderadas y bajas mostraron mayor supervivencia y mejores tasas de regeneración respecto del bosque testigo. Las áreas prioritarias a restaurar en el PPSC son aquellas que sufrieron altas severidades, debido a que la supervivencia en éstas fue la más baja, por lo que serían necesarias acciones de enriquecimiento con especies de crecimiento rápido y dosel amplio (teniendo en cuenta las especies preexistentes). Por último, gracias a este estudio, podemos afirmar que la metodología de teledetección aquí aplicada es útil para evaluar el estado de un bosque después de perturbaciones como incendios, permitiendo así aplicar acciones de restauración necesarias en esta y en otras áreas protegidas de manera más eficiente. 2024-01-01T00:00:00Z