Optimización de la extracción de fitometabolitos de cissampelos pareira, bioactivos contra veneno de bothrops diporus "yarará chica”

Abstract

El envenenamiento por mordedura de serpientes representa un problema de salud pública desatendido en muchos países tropicales y subtropicales. Los accidentes ofídicos desde 2017 son considerados por la Organización Mundial de la Salud (OMS) como una enfermedad tropical que “causan aproximadamente entre 81.000 y 138.000 muertes al año, y alrededor del triple de casos de amputación y discapacidad permanente” (OMS 2019). El uso de las plantas en la medicina indígena y folklórica se halla en franca revalorización dado el vasto conocimiento ancestral aborigen que es acervo cultural abundante en la región del Nordeste Argentino (Chifa et al. 2014). Su interés ha sido avalado por la OMS como consecuencia del examen crítico de las propiedades atribuidas, cuya posible confirmación o rechazo permitiría, no solamente depurar dicha tradición, sino además poner a disposición fármacos para ser aplicados en situaciones de emergencia (accidentes en regiones alejadas de centros de salud) mientras se espera la terapia de suero antiveneno (único tratamiento avalado por la OMS). Por lo mencionado, resulta relevante el estudio de nuevas drogas o fármacos preparados a partir de compuestos químicos de origen natural, los cuales podrían tener menor severidad de efectos secundarios a la vez que se validaría el uso etnofarmacológico. En el presente trabajo, el objetivo fue optimizar la técnica de extracción de bioactivos de interés en Cissampelos pareira especie utilizada como alexitérica y con un potencial uso en fitomedicina. Se utilizó el veneno de Bothrops diporus, principal ofidio causante de accidentes en la Argentina, y para la optimización se recurrió al programa Desing Expert® 12. Se obtuvieron 11 proporciones de los distintos solventes de extracción (Agua, Etanol, Hexano) realizándose en cada uno de los extractos el dosaje de fenoles, flavonoides, y actividades biológicas in vitro como inhibición de la actividad hemolítica indirecta e inhibición de la actividad procoagulante del veneno de B. diporus. El dosaje de fenoles totales y flavonoides se realizaron por medidas espectrofotométricas (Ding et al., 2016 con ligeras modificaciones; Lock et al., 2006; Ortega et al., 2016 respectivamente). Para las propiedades biológicas in vitro, se analizaron las actividades más representativas del veneno de B. diporus, considerando que un efecto inhibitorio de la actividad procoagulante y/o hemolítica indirecta por los extractos vegetales, justifica el uso tradicional de preparados a base de C. pareira para contrarrestar los efectos tóxicos del veneno. Se evaluaron los efectos de los extractos sobre la hemostasia, mediante el tiempo de coagulación (coagulómetro COL1 Wiener) y la Inhibición de la actividad hemolítica indirecta mediante placas de agar sangre-fosfatidilcolina (Gutiérrez et al, 1988; Otero et al, 1995). Los valores encontrados en las determinaciones, fueron evaluados en el programa Desing Expert® 12, proyectando un extracto optimo compuesto por 100% de etanol, con mayores concentraciones de bioactivos y una deseabilidad próxima a 1. Posteriormente se verifico los resultados obtenidos con el extracto optimizado, logrado corroborar la optimización de la extracción de bioactivos en el C. pareira.