Mice plasma fibrinogen consumption by thrombin-like enzyme present in rattlesnake venom from the north-east region of Argentina
Fecha
2004-12Autor
Maruñak, Silvana L.
Acosta, Ofelia Cristina
Leiva, Laura Cristina
Ruiz, Raquel Mónica
Aguirre, María Victoria
Teibler, Gladys Pamela
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
Due to variability of venom components from the same species of snakes that inhabit different regions,
particular properties of the venom of Crotalus durissus terrificus that inhabits the North-East of Ar-
gentina were studied. Gyroxin, a thrombin-like enzyme, was isolated from this venom by gel filtration and affinity
chromatography, it was found to be homogeneous according to SDS-PAGE, with a molecular weight of 33 kDa.
”Gyroxin syndrome” in mice was tested and it showed changes in the animal behavior, confirming that the isolated
thrombin-like enzyme is gyroxin. Effects of this enzyme and the crude venom on mice plasmatic fibrinogen levels
were determined. The mice plasma fibrinogen decreased rapidly until incoagulability during the first hour after
thrombin-Iike enzyme injection, then reaching its normal level 10 hours after injection; whereas crude venom
resulted in a 60% decrease of the mice plasma fibrinogen, reaching its normal level after the same period of
time. After 1 hour of gyroxin inoculation, intravascular coagulation was observed in histological cuttings of lung,
cardiac muscle and liver. The isolated enzyme showed strong hydrolyzing activity on fibrinogen and fibrin in
vitro, whereas the crude venom exhibited weak hydrolyzing activity on both substrates. It is probable that this
very low activity is due to the low percentage of the enzyme in the crude venom. Decreasing of plasmatic
fibrinogen levels may be due to either the coagulant or hydrolyzing actions of the enzyme. Consumo de fibrinógeno plasmático en ratones por acción de enzima con actividad trombínica
presente en el veneno de cascabel del nordeste argentino. Teniendo en cuenta la variabilidad
de los componentes del veneno de serpientes de una misma especie que habitan regiones diferentes, se deci-
dió estudiar las propiedades particulares del veneno de Crotalus durissus terrificus que habita el nordeste de
Argentina, Giroxina, una enzima con actividad trombínica, fue aislada del veneno por cromatografía de filtra-
ción por gel y de afinidad; se comprobó su homogeneidad y se determinó su peso molecular, 33 kDa, por SDS-
PAGE. Se ensayó el síndrome giroxina en ratones, los que mostraron cambios en el comportamiento, confir-
mando que la enzima tipo trombina aislada es giroxina. Se evaluó la acción de esta enzima sobre los niveles
de fibrinógeno plasmático en ratones, comparándola con la del veneno crudo. Se comprobó que la enzima pro-
voca una disminución de los niveles plasmáticos de fibrinógeno hasta la incoagulabilidad, durante la primer
hora de inoculación, mientras que el veneno entero produjo una reducción del nivel plasmático en un 60%; sin
embargo, en ambos casos, se evidenció una rápida reposición de fibrinógeno plasmático, alcanzando sus valo-
res normales en un plazo de 10 horas. Se observó coagulación intravascular con la administración de giroxina
una hora después de la inoculación, evidenciados en estudios histológicos de tejido pulmonar, cardíaco y he-
pático. En ensayos realizados in vitro, la enzima aislada mostró capacidad de degradar fibrinógeno como así
también coágulos de fibrina, mientras que el veneno exhibió débil actividad hidrolítica sobre ambos sustratos.
Es probable que esta baja actividad sea debida a la baja concentración de la enzima en el veneno. La dismi-
nución de los niveles de fibrinógeno plasmático observado en ratones se debería a la acción coagulante de la
enzima, sin embargo no se descarta que también contribuya a este proceso una acción hidrolítica sobre
fibrinógeno y fibrina por parte de la enzima.
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